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差速離心技術(shù)

2009-06-09 [2379]

差速離心是指低速與高速離心交替進行,使各種沉降系數(shù)不同的顆粒先后沉淀下來,達到分離的目的。沉降系數(shù)差別在一個或幾個數(shù)量級的顆粒,可以用此法分離。樣品離心時,在同一離心條件下,沉降速度不同,通過不斷增加相對離心力,使一個非均勻混合液內(nèi)的大小、形狀不同的粒子分部沉淀。操作過程中一般是在離心后用傾倒的辦法把上清液與沉淀分開,然后將上清液加高轉(zhuǎn)速離心,分離出第二部分沉淀,如此往復(fù)加高轉(zhuǎn)速,逐級分離出所需要的物質(zhì)。

差速離心方法較簡單,但分辨率不高,沉淀系數(shù)在同一個數(shù)量級內(nèi)的各種粒子不容易分開,常用于其他分離手段之前的粗制品提取。

例如用差速離心法分離已破碎的細(xì)胞各組份

離心力與離心機轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)換公式:

 

式中,RCF(relative centrifugal force)表示相對離心力,X為離心轉(zhuǎn)子的半徑距離,以cm為單位;g為地球重力加速度(980cm/sec2);n為轉(zhuǎn)子每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)(rpm)。

RCF(relative centrifugal force,相對離心力),由于各種離心機轉(zhuǎn)子的半徑或者離心管至旋轉(zhuǎn)軸中心的距離不同,離心力而受變化,因此在文獻中常用“相對離心力”或“數(shù)字×g”表示離心力,只要RCF值不變,一個樣品可以在不同的離心機上獲得相同的結(jié)果。

RCF就是實際離心場轉(zhuǎn)化為重力加速度的倍數(shù)。

 

圖2離心力與離心機轉(zhuǎn)數(shù)的轉(zhuǎn)換列線圖

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